Dna`nın Vektöre Aktarılması

Hem plasmid hem de insan DNA’sı aynı
restriksiyon enzimi ile kesilir.
 Enzim, plasmid DNA’yı tek bir restriksiyon
bölgesinden lacZ genini bozarak keser. Enzim
aynı şekilde insan DNA’sını binlerce DNA
parçası oluşturacak şekilde keser.
 Plasmid ve insan DNA’sı birbirine uyan
yapışkan uçlar oluştururlar.
 İnsan DNA fragmentleri kesilmiş plasmidlerle
karıştırılır.  Plasmid yapışkan uçları, insan DNA
fragmentlerinin komplementer yapışkan uçları
ile baz çiftleri oluşturur.
 Bunun yanı sıra, iki plasmidin bir araya gelmesi,
plasmidin kendi kendine kapanması ya da
plasmidin çeşitli DNA parçalarıyla birleşmesi
gibi kombinasyonlar da ortaya çıkabilir.
 DNA moleküllerini kovalent bağlarla
birleştirmek üzere DNA ligaz enzimi uygulanır.
 Sonuç olarak, rekombinant DNA’lardan oluşan
bir karışım oluşur.

__________________