Forum Aski - Türkiye'nin En Eğlenceli Forumu
 

Go Back   Forum Aski - Türkiye'nin En Eğlenceli Forumu > Eğitim - Öğretim > Dersler > Biyoloji
facebook bağlan


Pcr Basamakları

Biyoloji kategorisinde açılmış olan Pcr Basamakları konusu , Pcr Basamakları PCR BASAMAKLARI • Çoğaltılacak DNA denatüre edilerek (94°C’de 5 dakika) tek zincirli hale getirilir. • Isıya dayanıklı bir DNA Polimeraz olan Taq DNA Polimeraz reaksiyon ortamına ilave edilir. ...


Yeni Konu aç  Cevapla
 
LinkBack Seçenekler Arama Stil
Alt 06.04.2014, 15:50   #1 (permalink)

Kullanıcıların profil bilgileri misafirlere kapatılmıştır.
Standart Pcr Basamakları



Pcr Basamakları

PCR BASAMAKLARI
• Çoğaltılacak DNA denatüre edilerek (94°C’de 5 dakika) tek zincirli hale getirilir.
• Isıya dayanıklı bir DNA Polimeraz olan Taq DNA Polimeraz reaksiyon ortamına ilave edilir. DNA’nın çoğaltılması 72°C’de gerçekleşir.
1. Denatürasyon
- Hedef DNA’nın ilk Denatürasyon çok zor olabilir. Bu sebepten dolayı PCR İşlenme başlamadan önce içerisine Taq DNA Polimeraz katılmamış karışımların Bulunduğu ependorf tüpleri PCR cihazının sıcaklığı 100ºC’de 10 dakika kadar bekletilir. Sonra Taq DNA Polimeraz katılarak normal döngü işlemi başlatılır.
2.Primerle eşleşme (Annealing)
Primer eşleşme ısı aşırısı için en önemli parametredir Her primer için değişken olan karakteristik bir özelliktir.Primerlerin kaç bazdan oluştuğu,baz çeşitliliği ve ortamın iyonik kuvvetinden etkilenir. Teorik olarak hesaplanabilmektedir, fakat en doğru değer deneysel olarak belirlenir. En uygun Tm sıcaklığını belirlemek için gradientli PCR yapılır.
3. Uzama (Extension)
- Uzama safhası genellikle DNA Taq polimerazın en iyi çalıştığı sıcaklık olan72ºC’de gerçekleştirilir.
- Süresi çoğaltılacak hedef DNA’nın uzunluğuna göre ancak genellikle 1-2 dakika yeterlidir.
4. Döngü sayısı
- Döngü sayısı arttıkça ürün miktarı artar.
- Genellikle 25-35 döngü yeterlidir.
- Döngü sayısı çok olduğu zaman spesifik olmayan bağlanmalar olacağından (yanlış ürünlerin) miktarı da artar ve ürün kirlenir.

__________________



Jade isimli Üye şimdilik offline konumundadır Alıntı ile Cevapla
Cevapla

Yukarı'daki Konuyu Aşağıdaki Sosyal Ağlarda Paylaşabilirsiniz.


(Tümünü Görüntüle Konuyu Görüntüleyen Üyeler: 1
Jade
Seçenekler Arama
Stil

Yetkileriniz
Konu Açma Yetkiniz Yok
Cevap Yazma Yetkiniz Yok
Eklenti Yükleme Yetkiniz Yok
Mesajınızı Değiştirme Yetkiniz Yok

BB code is Açık
Smileler Açık
[IMG] Kodları Açık
HTML-Kodu Kapalı
Trackbacks are Açık
Pingbacks are Açık
Refbacks are Açık


Forum hakkında Kullanılan sistem hakkında
Forumaski paylaşım sitesidir.Bu nedenle yazılı, görsel ve diğer materyaller sitemize kayıtlı üyelerimiz tarafından kontrol edilmeksizin eklenmektedir.Bu nedenden ötürü doğabilecek yasal sorumluluklar yazan kullanıcılara aittir.Sitemiz hak sahiplerinin şikayetleri doğrultusunda yazılı, görsel ve diğer materyalleri 48 saat içerisinde sitemizden kaldırmaktadır. Bildirimlerinizi bu linkten bize yapabilirsiniz.

Telif Hakları vBulletin® Copyright ©2000 - 2016, ve Jelsoft Enterprises Ltd.'e Aittir.
SEO by vBSEO 3.6.0 PL2 ©2011, Crawlability, Inc.

Saat: 13:51